于非闇从46岁才开始研究工笔花鸟画，起步虽晚，但大器晚成，成就极大。他曾学过的园艺学、鸟类学为后来画工笔花鸟画打下了基础。到了40年代其名声与张大千不相上下。他研究工笔花鸟画，从学清代陈洪绶入手，后学宋、元花鸟画，并着意研究赵佶手法。在古物陈列所工作期间，接触到不少古画，开扩了眼界，提高了画艺。
作画主张师古而不泥古，更重师法造化。能再现一草一叶瞬间动态特点，而不似静物之拘板。除学习卷轴画外，又学宋纯丝古朴的装饰手法。在勾线用笔上吸收了书法的方法，填色上主张柔婉鲜华，表现出形象的气骨。反对过于工巧细密而失掉笔墨高韵和整体精神。作画不墨守成规，敢于创新。白描兰竹水仙，生动传神，秀雅清逸，所画牡丹能将春之花、夏之叶、秋之干萃于一枝。源于现实而高于现实，尽与自然相吻合。
于非闇的艺术特色可以从其师承关系上得知。陈洪绶对于非闇的影响巨大。陈洪绶，字章侯，号老莲。诸暨(今浙江诸暨)人。擅人物、山水、花鸟、竹石等，以工笔人物着称。花鸟等描绘精细，设色清丽，富有装饰味。亦能画水墨写意花卉，酣畅淋漓。
而陈洪绶又师法武林派蓝瑛和宋代李公麟。蓝瑛擅画山水，落笔纵横奇古，风格秀润。集取晋、唐、两宋，遍摹元代诸家笔法之优长。其画风是从多方面变代出来的。晚年作品渐趋苍劲疏宕。画风又有多种面貌，有些作品笔墨含蓄隽雅，有些作品青绿重设色，画法工细，色调浓丽，愈老而愈工。晚年他的笔法益苍劲，颇类沈周。他兼工人物、花鸟、兰竹、俱得古人三昧。
