1200字范文,内容丰富有趣,写作的好帮手!
1200字范文 > 乙型肝炎病毒表面抗体定量检测诊断试剂盒(时间分辨免疫荧光分析法)

乙型肝炎病毒表面抗体定量检测诊断试剂盒(时间分辨免疫荧光分析法)

时间:2021-12-16 06:53:03

相关推荐

乙型肝炎病毒表面抗体定量检测诊断试剂盒(时间分辨免疫荧光分析法)

乙型肝炎病毒表面抗体定量检测诊断试剂盒(时间分辨免疫荧光分析法)

【生产厂家】苏州新波生物技术有限公司

【批准文号】国药准字S0085

【剂 型】诊断试剂盒

【规 格】96人份

【医保类型】

【国家基本药物】否

【英文名】Diagnostic Kit for the Quantitative Detection of Antibody to Hepatitis B Surface Antigen(time-resolved immunofluorometric assay)

【正文】

【用途】

定量测定人血清中乙型肝炎表面抗体的含量。

【试验原理】

本试剂盒采用双抗原夹心时间分辨免疫荧光分析法(IFMA法)定量检测人血清乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)。以HBsAg包被反应板,用铕标记试剂(DTTA-Eu)标记HBsAg。待测样本加入反应板微孔后,样本中的抗-HBs与包被于于微孔表面的HBsAg结合。洗涤后,加入铕标记的HBsAg(HBsAg-DTTA-Eu),HBsAg-DTTA-Eu与结合在板上的抗-HBs反应,在微孔表面形成免疫复合物:HBsAg—抗-HBs—HBsAg-DTTA-Eu。洗涤除去游离的铕标记HBsAg,加入增强液将复合物上的Eu3+解离到溶液中,并与增强液中的有效成份形成高荧光强度的螯合物,其荧光强度与样本中的抗-HBs浓度成正比。通过剂量-反应曲线得出样本抗-HBs浓度值。

【主要组成成分】

1.抗-HBs校准品(已用中国药品生物制品检定所标准校正):1ml/瓶

A 0mIU/ml B 5mIU/ml C 10mIU/ml D 40mIU/ml E 160mIU/ml F 640mIU/ml

2.铕标记物:1瓶(0.3ml),使用前按需求量做1:50倍稀释

3.浓缩洗液:1瓶(40ml),使用前用去离子水作1:25倍稀释

4.铕标记稀释液:1瓶(20ml)

5.微孔反应板:一块(12×8,包被有HBsAg)

6.增强液:1瓶(20ml)

7.封片:3片(封板用)

8.说明书:1份

9.自封袋:1只

10.Tip头:20支

【适用仪器】

用WALLAC公司时间分辨荧光测定仪(1230、1234、1235、1420)或上海新波生物技术有限公司ANYTEST2000时间分辨荧光测定仪测量

【样本要求】

血清样本

【试验方法】

见操作流程表

1.试剂的准备

(1)洗涤液:将40mL浓缩洗液和960mL去离子水在干净的洗液瓶中混合,作为工作洗涤液备用。

(2)铕标记物:准确吸取0.3ml去离子水充分溶解标记物冻干品,并充分混匀,使用前一小时内用铕标记稀释液按1:50倍稀释并一次用完(使用一次性的塑料容器来配制)。

2.将试剂及所需数量的微孔反应条置室温(室温专指20-25℃范围,下同)平衡。

3.吸取100ul抗-HBs校准品及待检样本,按顺序加入微孔反应条小孔中并加贴封片。

4.微孔反应条在室温条件下,用振荡仪缓慢振摇孵育40分钟。

5.在第一次孵育结束后,小心将微孔反应条上的封片揭下并弃掉,将微孔反应条放入洗板机吸干各孔并每孔注入洗涤液400ul,再吸干各孔,重复以上洗涤4次,最后一次将微孔反应条拍干。

6.每孔中加入100ul铕标记物工作液,并加贴封片。

7.微孔反应条在室温条件下,用振荡仪缓慢振摇孵育40分钟。

8.第二次孵育结束后,小心将微孔反应条上的封片揭下并弃掉,将微孔反应条放入洗板机吸干各孔并每孔注入洗涤液400ul,再吸干各孔,重复以上洗涤6次,最后一次将微孔反应条拍干。

9.每一孔中加入增强液100ul(加样过程中避免碰到小孔边缘或其中的试剂,尽量避免污染),并加贴封片。

10.微孔反应条在室温下,用振荡仪轻摇5分钟(在半小时内完成测定)。

11.使用乙肝表面抗体定量测定试剂盒时必须使用6个校准品,或者使用两点定标方法。每次更换批号时必须使用试剂盒所提供的6个校准品作出曲线(双对数),校准品复孔使用以保证准确性。血样中抗-HBs浓度通过标定曲线得出。检查程序的参数是否如下所示。如不符,则修改。

分析类型:IFMA(时间分辨免疫荧光法) 曲线拟合方式:样条曲线 X轴:LOG Y轴:LOG-B

BLANKS(背景孔数):2 校准品复孔数:2 校准品浓度:5 校准品浓度:10

校准品浓度:40 校准品浓度:160 校准品浓度:640 待测样本孔数:1

【对试验结果的解释】

结果判读:建议浓度值≥10mIU/ml的样品判断为阳性,否则为阴性。浓度值>640mIU/ml的血样应稀释后再计算浓度值,稀释后浓度值应在线性范围内。

以下三点如不符合要求,应重新进行实验。

(1)A点计数值应<5000,F点计数值应>80000。

(2)剂量反应曲线的线性相关系数r值应>0.9800。

(3)典型的剂量反应曲线

【该试验方法的局限性】

血样成份复杂,存在多种未知的干扰因素,可能造成假阴性或假阳性结果;单项检测结果临床只能作为参考。

【产品性能指标】

1.本试剂盒测定范围:5mIU/ml-640mIU/ml;

2.典型的剂量反应曲线见右图;

3.最低检出量应不高于10mIU/ml;

4.剂量反应曲线的线性相关系数r值应>0.9800。

【注意事项】

1.理解本说明书对于成功的使用本试剂盒是很重要的,试剂盒中所提供的试剂是一个整体,不要混用不同批号的试剂,不要使用过期的试剂。

2.尽量建立一个干净无尘的试验室环境,对试验的成功起到决定性作用。(因为尘土中含很多金属离子,会影响试验结果)。

3.试剂盒与待检样本使用前必须达到室温。

4.为保证实验的准确性,处理血样时应做到没有纤维蛋白、红细胞等,并要保证血样吸取的量的准确性,否则容易引起测量值的差异。建议不使用高血脂、高胆红素和高血红蛋白样本。

5.洗板机在每天使用时应进行校正注液量和残留量,注意管道是否畅通。洗涤时,确认每孔中的洗涤液都注满微孔,洗涤后,每个孔必须是干的,如果仍有水可扣在吸水纸上拍干。

6.吸取增强液和铕标记物时,请使用试剂盒提供的吸头,避免尘土等不必要的污染。加增强液时吸头应悬空,避免碰到小孔边缘或其中试剂造成增强液的污染。

7.使用医用蒸馏水或去离子水配制洗液。

8.使用干净的一次性容器配制铕标记物,应避免铕标记稀释液进入铕标记物原液中。

9.封片不能重复使用。

10.如需稀释标本,请用小牛血清稀释。

11.所有的样品和本试剂盒应作为潜在的传染源看待,请按传染病实验室检查规程操作。

12.如对实验结果有疑问,应重复试验。

【包装、规格】

96人份/盒

【贮存】

本试剂盒应置2~8℃保存。

【有效期】

以生产日期起有效期为12个月。

抗-HBs定量测定试剂盒(IFMA法)操作流程表:

【批准文号】

本内容不代表本网观点和政治立场,如有侵犯你的权益请联系我们处理。
网友评论
网友评论仅供其表达个人看法,并不表明网站立场。