BRCA1/2基因突变的检测方法与流程

BRCA1和BRCA2均属肿瘤抑制基因，BRCA1/2编码的蛋白作用于多种细胞生命活动过程，包括DNA损伤修复、基因转录调控和细胞周期调节等。BRCA基因编码蛋白通过同源重组（homologous recombination）参与DNA双链 （dsDNA）损伤修复，BRCA1/2基因突变乳腺癌患者由于同源重组修复功能缺陷，可能对铂类或多聚(ADP-核糖)聚合酶[ poly ( ADP-ribose ) polymerase, PARP ]抑制剂等致DNA损伤药物更为敏感。

检测BRCA1和BRCA2基因突变

检测BRCA1和BRCA2基因突变的方法，其包括以下步骤：

(1)提取全血dna；（外周血dna）

(2)利用上述检测brca1/2基因突变的引物组合物通过多重pcr扩增目标区域；

(3)扩增产物构建文库；（构建文库建库按照illumina标准建库流程进行）

(4)高通量测序；（测序平台为illumina测序平台）

(5)测序结果处理及分析。（测序读段结果与人类基因组hg19进行比对，得到读段在参考基因组上的位置，使用gatk软件分析变异位点和插入缺失序列情况，vep软件注释）

当待测的dna分子来自多个受试样品时，每个样品的扩增产物在构建文库时可以被加上不同的标签序列(barcode)，以在测序过程中进行