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炭疽杆菌(BA)IgG 抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

时间:2024-03-18 05:17:47

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炭疽杆菌(BA)IgG 抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

使 用 说 明(96T/48T)

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化BA纯化抗原预包被板ELISA 原理,检测人血清/血浆中存在的炭疽 IgG 抗体,并配以酶标记抗人IgG单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正 比。生物素系统(biotin-avidin system)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。

[用途]

本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的炭疽杆菌(BA)抗体,用于炭疽菌苗接种后效果监测和流行病学调研及从患者标本中未获得炭疽芽孢杆菌阳性和分离结果时,可依据血清学结果辅助诊断。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板 1块(8X12/4X12)

2、阴性对照 1瓶(直接使用)

3、阳性对照 1瓶(直接使用)

4、标本稀释液

1瓶(20/10 ml,直接使用)

5、酶结合物 1瓶(12/5ml,直接使用)

6、浓缩洗涤液

1瓶(20/10ml,加蒸馏水1:30稀释使用)

7、显示剂A、B液 各1瓶(5/3ml)

8、终止液(2M H2SO4) 1瓶(5/3ml)

9、说明书 1份

[操作步骤]

1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。

2. 标本稀释:用标本稀释液以1:11(20ul—200ul)稀释标本。于反应板中加已稀释待检标本及阴阳性对照(100ul)各一孔,设空白对照一孔(加100ul标本稀释液)轻拍混匀。

3. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。

4. 加酶结合物:每孔2滴,混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。

5. 显色:每孔加显色剂A、B各一滴,轻拍混匀(或震荡器混匀)后置37℃10分钟。

[结果判断]

1.目测:在白色背景下观察各孔显色情况,蓝色者为阳性,无色者为阴性。

2. 酶标仪测定:每孔加终止液一滴,混匀后在450nm下测定各孔O.D值。

S/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。

S/N≥2.1为阳性;

S/N<2.1为阴性

阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计算, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算 ;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1. 微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余 者封存置2-8℃。

2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。

3. 洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。

4. 试剂置2-8℃存放,不能冻结,有效期10个月。

5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。

6. 最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周(样本应避光)。

7. 试剂盒中阴阳性对照虽然已经过灭活和处理后无污染,但也应该按照实验室常规作为污染物对待处理,以保证生物安全性。

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